UE de Technologies Cellulaires - Dialogue Cellules Matrice

Le but de ces TP est de mieux comprendre les interactions cellules-matrice extracellulaire. Pour cela, la fibronectine recombinante a été surproduite dans la bactérie E. coli, sous sa forme sauvage ou sous différentes formes mutées.

Ces différentes protéines seront dosées, analysées sur gel SDS-PAGE puis utilisées pour réaliser, notamment, des tests cellulaires d'adhérence et d'étalement en utilisant des cellules immortalisées en culture.

Puis, afin de caractériser les intégrines impliquées dans l'interaction cellules-fibronectine, un test d'adhérence cellulaire est réalisé en présence d'anticorps anti-intégrines. Enfin, la voie de signalisation déclenchée par les interactions cellules-matrice extracellulaire est étudiée en visualisant la phosphorylation de la protéine FAK, soit par Western-blot, soit par Immunofluorescence en microscopie confocale.